第一章 紫外可见分光光度法：紫外-可见分光光度法（ultraviolet and visible spectrophotometry，UV-vis）是基于物质分子对紫外-可见区辐射的吸收特性建立起来的一种定性、定量和结构分析的方法。这种分子光谱主要产生于分子的外层价电子在电子能级间的跃迁。紫外光是波长为10 nm ~ 400 nm的电磁辐射，分为远紫外光（10 nm ~ 200 nm）和近紫外光（200 nm ~ 400 nm）。由于空气中的氧、二氧化碳及水蒸气等都吸收远紫外光，因此要研究物质分子对远紫外光的吸收必须在真空条件下进行，所以远紫外区又称真空紫外区。鉴于真空紫外需要昂贵的真空紫外光谱仪器，故其应用受到限制。通常所说的紫外-可见光谱法，实际上是指近紫外-可见吸收光谱（200 nm ~ 800 nm）。由于电子光谱的强度较大，故紫外-可见分光光度法灵敏度较高，一般可达10-4 g·mL-1 ~ 10-6 g·mL-1，部分可达10-7 g·mL-1。准确度一般为0.5%，采用性能较好的仪器其准确度可达0.2%。紫外-可见分光光度法具有仪器普及、操作简单、重现性好且灵敏度较高等优点，广泛应用于食品分析、医药卫生、临床检验、生物化学等领域。第1节 Lambert-Beer 定律第2节 基本原理第3节 紫外可见分光光度计第4节 定性与定量分析1.1朗伯-比尔定律:朗伯比尔定律：当一束平行单色光通过均匀溶液时，溶液的吸光度A与其浓度和液层厚度成正比 。A=kclLamber-Beer定律的适用条件入射光为单色平行光。均一的稀溶液、气体等，无溶质、溶剂及悬浊物引起的散射该定律适用于固体、液体和气体样品在同一波长下，各组分吸光度具有加和性 应用：多组分测定[判断题]有色溶液的最大吸收波长随溶液浓度的增大而增大。
1.2紫外可见分光光度法产生的基本原理:由于分子吸收紫外-可见光区的电磁辐射，分子中价电子（或外层电子）的能级跃迁而产生电子跃迁类型不同，实际跃迁需要的能量不同， σ→σ* ～150nm n→σ* ～200nm π→π* ～200nm n→π* ～300nm 吸收能量的次序为： σ→σ*＞n→σ*≥π→π*＞n→π*紫外光谱主要有R带、K带、B带和E带影响紫外光谱的因素有：共轭效应、跨环效应、溶剂效应和PH的影响。
1.3紫外可见分光光度计:紫外-可见分光光度计是在紫外-可见光区可任意选择不同波长的光测定吸光度的仪器。仪器的类型很多，性能差别悬殊，但基本原理与结构相似。主要部件有：光源、单色器、样品室、检测器和数据处理系统。
1.4定性与定量分析:紫外-可见分光光度法是一种广泛应用的定量分析方法，也是对物质进行定性分析和结构分析的一种手段，同时还可以测定某些化合物的物理化学参数。一、定性分析利用紫外-可见吸收光谱进行定性分析时，其主要依据是化合物的吸收光谱特征。一般采用比较光谱法，即在相同测量条件下（仪器、试剂、pH等），比较试样与标准化合物的吸收曲线，如果吸收光谱的形状、吸收峰数目、各吸收峰的波长位置、强度及相应的吸光系数值等完全一致，则可能是同一种化合物，如两者有明显差别，则肯定不是同一种化合物。二、定量分析紫外-可见光谱法定量分析的依据是Lambert-Beer定律，即物质在一定波长处的吸光度与它的浓度成正比。有吸光系数法、标准曲线法和标准对照法
对
错
答案：错
[判断题]在紫外吸收光谱中，随着共轭双键数目的增多，吸收峰将向长波方向移动。
对
错
答案：对
光通过该药物溶液的光程很长
该药物溶液的浓度很大
该药物对某波长的光吸收很强
测定该药物的灵敏度高
答案：该药物对某波长的光吸收很强测定该药物的灵敏度高
吸收波长向短波方向移动
吸收波长向长波方向移动
吸收强度增强
吸收强度减弱
答案：吸收强度增强
0.443
0.434
0.500
0.333
答案：0.434
