- DNA的变性:( )
- 引物长度的增加可以提高扩增特异性
- 外源基因只能插到融合蛋白的氨基端进行融合表达
- 离子交换分离纯化蛋白是利用了蛋白的()性质
- PCR技术获得了诺贝尔生物学奖
- 我们可以设计扩增任意DNA片段的引物
- 转化过程中,为确保外源DNA进入细胞,我们需要对细胞进行热激,其热激温度是()℃
- Western blot实验时,湿转法不可以一次转两块PAGE胶。
- 为了方便后续酶切连接,引物要设计上酶切位点
- Western blot实验时,NC膜用之前一定要先活化。
- 插入到pBV-dps-2x-6his融合表达的外源目的基因5’-端的内切酶应当是
- 关于TRIzol法提取细胞总RNA,下列说法正确的是?
- 制备感受态细胞的过程中,离心后倒置离心管的作用是()
- SDS-PAGE分析或鉴定蛋白时分离胶的浓度不可能是
- 关于AMV和MMLV,下列说法正确的是?
- Western blot实验时,半干法不需要转膜缓冲液。
- 下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是:
- 采用何种方式进行基因工程蛋白诱导表达与表达的基因有关
- 配制400ml LB培养基,为了使培养基中抗生素(Amp)浓度达到50ug/ml,下列说法正确的是
- 诱导大肠杆菌感受态时,下列操作不正确的是
- 在配置PAGE凝胶时,不存在的物质是
- 促进丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺形成聚丙烯酰胺是
- Western blot实验时,关于洗涤,下列说法正确的是?
- Western blot实验时,半干法可以一次转两块PAGE胶。
- 下列仪器的用途,说法不正确的是
- 提取质粒时,加入变性溶液后,下列哪些操作容易导致变性过度
- PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,下列有关PCR过程的叙述,不正确的是( )
- 扩增产物的大小是引物结合的位置绝对的
- PCR过程中的DNA变性是由于
- 提取RNA时,异丙醇的作用是?
- RT-PCR的引物有哪些?
- 所获得的RNA其A260/A280的比值通常为?
- pBV220插入片段必须要有
- 要配置.酚:氯仿:异戊醇(V:V:V=25:24:1)200ul,则在100ul氯仿-异戊醇(24:1)溶液中应加入饱和酚的体积是
- dPCR能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。
- pBV220表达载体是原核表达系统只能表达原核基因
- 质粒和目的基因的酶切过程中,所需的水浴温度是()℃,所需时间是()h
- 提质粒时,溶液I中含EDTA的作用是
- 琼脂糖凝胶电泳时电压越大越好
- 提取质粒时,溶液III的主要成分是
- 插入表达载体的目的基因不能含有多克隆位点上所用内切酶切点的序列
- 本实验中,诱导表达外源蛋白的诱导温度是
- 下列关于大肠杆菌DH5α说法错误的是
- 关于微量移液器的使用,下列操作不正确的是
- 就分于结构而论,质粒是( )
- 凝胶成像系统观察核酸电泳的光源
- 关于Dps蛋白,下列说法错误的是
- 若要移取1ul酶,最大量程分别如下的移液器应选哪个
- dps基因末端添加的6his作用是
- 关于pBV220载体,下列说法不正确的是
- 构建pBV-dps-2x-6his进行了几轮PCR扩增?
- 外源目的基因应插入到表达载体的():
- 进行融合蛋白的表达一般不会影响目的蛋白的生物学活性。
- 如果要获得单独的目的蛋白,应在目的蛋白和融合蛋白之间设计蛋白酶酶切位点。
- 与pBV-dps-2x-6his进行重组,构建融合表达载体时,外源目的基因上下游必须设计上XhoI和XbaI酶切位点。
- 影响RT-PCR 结果的因素有哪些?
- 关于利用Phusion酶进行PCR反应,下列说法正确的是?
- 反转录反应的模板可以是总RNA,也可以是mRNA
- qPCR能够实时测定特异性产物的量,并推断目的基因的初始量,并且不需要取出PCR产物进行分离,就能得到数据。
- 关于Phusion高保真酶,下列说法正确的是
- TRIzol含有哪些成分?
- 用NanoDrop测样品时,仅需0.5-2 µL 样品。
- 提取RNA时,75%乙醇的作用是?
- 通常来说,含有ploy(A)尾巴的是?
- 提取总RNA的方法有哪些?
- 检验DNA分子是否降解采用的是SDS-PAGE电泳
- 对Dps蛋白功能描述不正确的表述是:
- Fenton反应能产生超氧自由基
- DNA分子在Fenton试剂作用下被降解
- 细菌更容易吸收的铁元素形式是:
- 6个组氨酸标签(6His)连接在DPS蛋白的()
- 用工程菌进行诱导表达蛋白时
- 凝胶过滤依据分子量大小分离蛋白,小分子量的先洗脱出来,大分子量后洗脱出来。
- 包涵体是指没有正确折叠的目的蛋白。
- 纯化蛋白时可以通过煮沸破碎菌体细胞壁
- HRP标记的二抗的显色试剂是NBT/BCIP
- Western blot时,半干转膜法电压不能超过25V
- 半干转膜仪正极在上,负极在下。
- 关于湿法转膜法操作,下列说法正确的是?
- 进行免疫学检测时,关于二抗,下列说法正确的是?
- 表达载体与克隆载体不同,pBV220载体中不属于基因表达元件的是
- 分离胶倒入胶板后要立即加一层双蒸水,下列说法错误的是
- 大肠杆菌原核表达载体一般不具备的特点是
- 若电泳过程中溴酚蓝指示剂不向负极移动,不可能的原因有
- 分离胶缓冲液的pH是
- 进行菌落PCR时,能扩增出与目的序列大小相当的特异片段的转化子为()
- 不必提取质粒DNA进行酶切鉴定,而是直接以菌体热解后的DNA为模板进行PCR扩增的鉴定阳性克隆的方法是()
- 下列外源DNA导入宿主细胞的方法中,不是依据转化方式原理而进行的方法是( )。
- 最常用的筛选转化细菌是否含质粒的方法是
- 大肠埃希菌转化实验中,出现假阳性克隆的原因可能有( )。
- 进行构建重组质粒时选择的内切酶,其酶切位点序列不能与目的基因中的序列一致。
- 目的基因上下游是否需要设计起始密码子和终止密码子需要根据表达载体的不同而确定。
- DPS表达蛋白C-端连上6个组氨酸(6His)的作用
- pBV220表达载体用于抗性筛选的基因是
- DNA标准分子量DL2000共有六条条带,其中分子量大小排在第三大的是500bp条带。
- 将目的基因导入微生物细胞的最常用方法是()
- 在制备大肠杆菌感受态细胞时应取用( )的大肠杆菌。
- 细菌处于容易吸收()的状态叫感受态。
- 制备感受态细胞时,要用低渗CaCl2溶液在()℃时处理快速生长的对数期细菌
- 对感受态细胞进行热激处理时,所使用的温度是( )℃
- 在蓝白斑筛选实验中,转化了重组质粒的细菌长出的菌落为()
- 设计适用于蓝白斑筛选的基因工程菌为()菌株。
- 对感受态细胞进行热激处理时,所使用的温度是()℃
- 在蓝白斑筛选实验中,转化了空载体的细菌长出的菌落为()
- 异丙基硫代半乳糖苷作为一种很强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,它可诱导LacZ的表达。它的缩写是()
- 关于DNA Marker的使用,下列说法正确的是
- 标准分子量DNA(DNA Marker)的主要作用是
- 制胶板和梳子的使用,说法正确的是
- 关于琼脂糖凝胶电泳下面正确的说法是
- 配置琼脂糖凝胶时,下面正确的做法是
- PCR的反应体系要具有以下条件:
- 在PCR反应中,下列哪项可以引起非靶序列的扩增的增多
- 使用Taq DNA聚合酶应注意
- 决定扩增产物片段长度的主要因素是
- PCR产物短期存放可在什么温度下保存
- 抽提质粒时,加入溶液II可使溶液pH达到
- 质粒提取过程中,加入下列哪种试剂使DNA变性
- DNA变性时被破坏的是
- 碱法抽提质粒DNA的原理中,下列说法正确的是
- 微量移液器移液时,下列说法正确的是
- 下列不是LB培养基成分的是
- 打开高压蒸汽灭菌器取出灭菌物品的时间是
- 制作固体培养基时,琼脂的含量为
- LB培养基中为细菌生长提供主要氮源的是
- 分离纯化好氧微生物不适宜用的方法是
- 称量有毒化学试剂时,下列操作错误的是
- 超净工作台主要是通过空气过滤除菌
- 保存某些长期低温保存的样品、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等,冰箱的温度最好设置在
- 下列试剂对呼吸道有强烈刺激,需要在通风橱中操作的是
- 关于课程中表达的蛋白的结构和功能,下列说法错误的是
答案:包括双螺旋的解旋
答案:对
答案:错
答案:带电荷不同
答案:错
答案:错
答案:42
答案:错
答案:对
答案:错
答案:XhoI
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