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生物化学实验(齐鲁工业大学)

  1. 磷的鉴定是下列哪种试剂( )。


  2. A:定磷试剂 B:地衣酚试剂 C:0.1 mol/L AgNO3溶液 D:浓硫酸溶液
    答案:0.1mol/LAgNO3溶液
  3. 本实验中,用到( )方法检测蛋白质

  4. A:酚试剂法 B:紫外吸收法 C:考马斯亮蓝法 D:双缩脲法
    AI参考:正确选项是【D:双缩脲法】。双缩脲法是一种用于检测蛋白质的常用方法,其原理是蛋白质中的肽键在碱性条件下可以与双缩脲试剂发生紫色反应。这种方法简单易行,灵敏度高,适用于检测蛋白质的存在。其他选项中,酚试剂法主要用于检测酚类物质,紫外吸收法主要用于检测核酸,考马斯亮蓝法则是一种用于测定蛋白质浓度的方法,但不适用于检测蛋白质的存在。因此,本实验中用到的方法是D:双缩脲法。'
  5. 下列哪个性质是氨基酸和蛋白质所共有的?( )

  6. A:变性性质 B:沉淀反应 C:双缩脲反应 D:两性性质
    答案:等电点性质;两性性质
  7. 在温度对酶活力影响的实验中,没有设置( )温度 。

  8. A:60℃ B:37℃ C:0℃ D:115℃
    AI参考:在温度对酶活力影响的实验中,没有设置115℃温度。'
  9. 双倒数作图法测定а-淀粉酶米氏常数,可以从1/[S]对1/v作图得到一条直线,Vmax值可以从( )得到。

  10. A:直线斜率 B:直线与y轴截距的倒数 C:直线与y轴截距 D:直线与x轴截距的负倒数
    答案:直线与x轴截距的负倒数
  11. 关于考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量,下列说法错误的是()

  12. A:制作蛋白标准曲线的时候,蛋白标准品最好是从高浓度到低浓度测定,防止误差 B:必须要掌握好分光光度计的正确使用 C:严禁用手指触摸比色杯的透光面 D:比色杯内附着的颜色可以用70%的酒精洗掉
    答案:595nmAI参考:正确选项是【制作蛋白标准曲线的时候,蛋白标准品最好是从高浓度到低浓度测定,防止误差】。考马斯亮蓝染色法是一种常用的蛋白质测定方法,其原理是蛋白质与考马斯亮蓝结合后形成复合物,可以通过比色法测定蛋白质浓度。在制作蛋白标准曲线时,应该先配制低浓度的蛋白溶液,然后逐步增加浓度,这样可以得到一个完整且准确的工作曲线,从而更好地反映蛋白质含量与吸光度之间的关系。如果先从低浓度到高浓度配制标准品,可能会由于样品之间的差异或误差导致数据不准确,影响工作曲线的精度。因此,选项A正确。同时,为了保证分光光度计的正常使用和准确测定,需要熟练掌握其正确使用方法,选项B也是正确的。关于比色杯内附着的颜色,考马斯亮蓝复合物不易溶于水,但是可以溶于酒精等有机溶剂,因此可以用70%的酒精洗掉比色杯内附着的颜色,选项D也是正确的。然而,严禁用手指触摸比色杯的透光面,因为这可能会污染比色杯,影响测定结果,选项C的说法是不正确的。'
  13. 蛋白酶活力测定中,得知在最适反应条件下,在0.1mL酶样品的作用下,每10分钟有1mg酪氨酸产生,则1 mL酶样品所含的酶活力( )。

  14. A:1000U B:10U C:10000U D:100U
    答案:300,000AI参考:在蛋白酶活力测定中,每一种酶都表现出一定数量的催化反应的效率单位。在此题目中,已经明确告知在最适反应条件下,每10分钟有1mg酪氨酸产生。而酪氨酸的重量与酶活力单位之间的关系,取决于具体的酶种类和测定方法。通常,每生成1mg的产物(例如酪氨酸),我们通常会使用一个特定的单位数来表示酶的活力。已知在这个例子中,每10分钟有1mg酪氨酸产生,那么我们就可以知道在0.1mL(即0.001mL)的酶样品中,有(或可能是)每单位时间产生1个单位的酪氨酸。如果我们知道这是在"最适反应条件"下,那么这意味着在这个特定条件下,每单位酶会生成1mg的产物(或者反过来,生成产物所需的单位酶最少为0.001单位)。那么如果现在我们知道有一毫升的酶样品,也就是我们有更多酶的数量,我们可以通过比例关系计算出更多的酶可以生成多少mg的产物。例如我们知道在最适条件下每毫升有(单位数)个单位酶产生(每个单位酶所需的反应体积是0.1毫升),所以有单位数*反应体积*最适单位浓度(在这个情况下就是单位时间内生成的产物量)=总的产物量。所以在这个例子中,总的产物量就是(单位数)*(0.1毫升)*(1毫升)=(单位数)*1=1mg。所以我们可以得出结论:在我们的例子中,每毫升的酶样品含有至少(单位数)*(0.1毫升)= 0.1单位的酶。由于我们已知在最适条件下每单位酶会生成1mg的产物,所以我们可以得出结论:每毫升的酶样品含有至少10单位的酶活力。因此,正确答案是B:10U。'
  15. 在本实验中,最靠近点样端的是?( )

  16. A:清蛋白 B:β-球蛋白 C:α₁-球蛋白 D:γ-球蛋白
    AI参考:最靠近点样端的是:C:α₁-球蛋白。在免疫学实验中,各种蛋白质样品通常会通过电泳分离后进行染色。清蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白等都是蛋白质样品,它们在电泳时的迁移距离是有一定规律的。其中,α1-球蛋白是最靠近点样端(电泳开始时所加的样品端)的蛋白质。因此,最靠近点样端的是α1-球蛋白。'
  17. 为了准确称量5 mg的药品,需要用下面哪种规格的天平?( )

  18. A:精确度0.0001 g B:精确度0.01 g C:精确度0.001 g D:精确度0.1 g
    AI参考:正确答案是C:精确度0.001 g。为了准确称量5 mg的药品,需要使用精确度为0.001 g的天平,以确保称量的准确性和可靠性。选项A、B、D中的精确度分别为0.0001 g、0.01 g和0.1 g,均低于所需精确度,无法满足准确称量的要求。因此,答案为C。'
  19. 关于本实验涉及的时间问题,下列说法错误的是( )

  20. A:在5分钟至20分钟之间,染料与蛋白质结合物颜色的稳定性最好 B:染料与蛋白质结合物的颜色能在1h内保持稳定 C:染料与蛋白质结合物的颜色能在10分钟内保持稳定 D:染料与蛋白质结合的过程,大约只要2分钟即可完成
    AI参考:正确选项是C:染料与蛋白质结合物的颜色能在10分钟内保持稳定。根据题目描述,实验涉及的时间问题应该是在5分钟至20分钟之间,染料与蛋白质结合物颜色的稳定性最好,所以选项A正确。而染料与蛋白质结合物的颜色能在1h内保持稳定,即选项B也是正确的。但是题目中没有提到染料与蛋白质结合物的颜色能在2分钟内或更短的时间内保持稳定,因此选项D也正确。选项C不符合实际情况,因此是错误的。因此,正确答案是C:染料与蛋白质结合物的颜色能在10分钟内保持稳定。'
  21. 下列( )与茚三酮反应产生黄色。

  22. A:天冬氨酸 B:脯氨酸 C:亮氨酸 D:赖氨酸
    AI参考:正确答案是D:赖氨酸。在氨基酸缩合阶段产生的二肽中间产物和各种肽键物质均与茚三酮在碱性条件下反应,赖氨酸可以与茚三酮反应产生黄色,其他选项都不具备这种反应特性。所以,答案是D。'
  23. 对于DNA琼脂糖凝胶的制备描述不正确的是:

  24. A:琼脂糖需用缓冲液溶解 B:琼脂糖的溶解一般在加热条件下 C:琼脂糖加热后不需等待其凝固,即可进行电泳 D:琼脂糖的溶解液加热一般在微波炉中进行
    AI参考:对于DNA琼脂糖凝胶的制备描述不正确的是琼脂糖加热后不需等待其凝固,即可进行电泳。琼脂糖凝胶电泳是一种常用的DNA分离技术,其原理是利用琼脂糖凝胶的电导率来分离DNA分子。在溶解琼脂糖凝胶时,通常需要使用缓冲液并在加热条件下进行。在溶解完成后,凝胶需要冷却至室温,然后再进行电泳。如果加热后立即进行电泳,可能会导致凝胶变形或破裂。因此,选项C是不正确的描述。其他选项A、B和D都是正确的描述。'
  25. ‍一个蛋白质混合样品溶液经过凝胶过滤层析,先流出柱外的是( )

  26. A:相对分子质量小的分子 B:相对分子质量大的分子 C:与相对分子质量无关 D:不确定
    AI参考:一个蛋白质混合样品溶液经过凝胶过滤层析,先流出柱外的是相对分子质量小的分子。凝胶过滤层析是一种基于分子质量的层析技术,它通过凝胶颗粒上的孔隙来过滤相对分子质量较大的蛋白质分子,而相对分子质量较小的分子则能够更容易地通过凝胶颗粒之间的间隙,因此会先流出柱外。因此,答案为A:相对分子质量小的分子。'
  27. 本实验中,用( )方法来检测NH4+。


  28. A:奈式试剂 B:(NH4)2SO4 C:乙醇 D:三氯乙酸
    AI参考:正确选项为A:奈式试剂。奈式试剂是一种常用的检测铵根离子的试剂,能够与铵根离子发生反应生成红色沉淀,从而判断样品中是否含有铵根离子。其他选项B、C、D均与检测铵根离子无关。'
  29. 在实验过程中,最关键的步骤是( )

  30. A:染色 B:电泳 C:透明 D:点样
    AI参考:正确选项是【C:透明】。在实验过程中,透明是关键的步骤,因为只有透明才能让各种物质成分能够透过,才能进行后续的实验操作。染色、电泳和点样都是实验过程中的辅助步骤,对实验结果的影响不是最关键的。'
  31. 下列氨基酸能与醋酸铅反应的是

  32. A:甲硫氨酸 B:丝氨酸 C:半胱氨酸 D:苏氨酸
    AI参考:正确答案是C:半胱氨酸。甲硫氨酸、丝氨酸、苏氨酸等氨基酸均不能与醋酸铅反应,而半胱氨酸含有巯基,可以被醋酸铅氧化形成二硫键,使半胱氨酸转变为甲酰基化的化合物,从而发生反应。因此,能够与醋酸铅反应的氨基酸是C:半胱氨酸。'
  33. 加入24-二硝基苯肼,颜色深的试管是因为()含量多。


  34. A:三氯乙酸 B:硫酸肼 C:都不是 D:3-磷酸甘油醛
    AI参考:正确答案是D。三氯乙酸和硫酸肼都为白色结晶性粉末,不会使溶液颜色加深。从题目给出的信息来看,是加入2,4-二硝基苯肼后颜色深的试管,说明反应生成的物质使溶液颜色加深,而3-磷酸甘油醛为还原性糖,在碱性条件下与二硝基苯肼反应生成红色的络合物,因此溶液颜色加深。所以正确答案为D,即3-磷酸甘油醛含量多。'
  35. 糖酵解反应过程中唯一一步脱氢反应是(    )


  36. A: B: C: D:
    AI参考:正确答案是【D:3-磷酸甘油酸转变为磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)的反应】。糖酵解过程中,唯一一步脱氢反应是3-磷酸甘油酸转变为磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)的反应。这个反应是由烯醇化酶催化的可逆反应,需要消耗一分子NAD⁺并产生一分子NADH⁺,因此是糖酵解过程中唯一一步脱氢反应。'
  37. 本实验过程中,所用的显色剂是( )


  38. A:Folin-酚试剂 B:都不是 C:三氯乙酸 D:NaCO3
    AI参考:正确选项是【A:Folin-酚试剂】。Folin-酚试剂是一种常用的显色剂,常用于测定蛋白质、糖类等有机物的含量。在实验过程中,它与蛋白质等物质发生显色反应,从而可以检测这些物质的含量。因此,本实验过程中所用的显色剂是Folin-酚试剂。其他选项B、C、D都不是显色剂,因此不符合题意。'
  39. 本实验中,分光光度计的波长使用( )nm。

  40. A:280 B:540 C:680 D:595
    AI参考:正确选项是【D:595 】。本题考查光学分析仪器的基本知识。分光光度计是利用物质对不同波长光的吸收特性对物质进行定性和定量分析的仪器。一般选用最大吸收波长的40~80%范围进行比色分析,常用的有可见光分光光度计和紫外分光光度计。本实验中,题目未给出具体实验内容,但根据分光光度计的使用原理,通常选用最大吸收波长范围进行比色分析,因此选项D,即595nm最为合适。'
  41. 下列描述正确的是( )

  42. A:待测蛋白酶粉用磷酸缓冲液溶解和稀释 B:吸光常数K只要大于90就可以使用 C:加入酶液后,常温下就可以水解酪蛋白 D:待测样品至少要做2个平行试样
    AI参考:正确选项为:A:待测蛋白酶粉用磷酸缓冲液溶解和稀释D:待测样品至少要做2个平行试样解释:A. 待测蛋白酶粉用磷酸缓冲液溶解和稀释:蛋白酶粉溶解和稀释需要使用磷酸缓冲液,这样可以保持酶的活性,并使酶反应在适宜的pH下进行。B. 吸光常数K只要大于90就可以使用:这个说法不准确,吸光常数K是用来描述酶促反应速度与底物浓度的关系,与使用与否没有直接关系。C. 加入酶液后,常温下就可以水解酪蛋白:酶促反应需要一定的时间和温度条件,不同酶在不同温度下的活性不同,所以不能简单地认为加入酶液后就可以水解酪蛋白。D. 待测样品至少要做2个平行试样:这是为了保证实验结果的准确性,平行试验可以消除实验误差,得到更准确的结果。'
  43. 离心机的正确操作方法( )

  44. A:确认转子完全停转后,打开门盖,取出离心管 B:运行过程中可以移动离心机,严禁打开门盖 C:设置的转子号可以与所用转子的配置规格不相符 D:装有溶液的离心管连同试管套一起用电子秤称重配平,必须对称放入转子
    AI参考:正确选项为:A:确认转子完全停转后,打开门盖,取出离心管 和 D:装有溶液的离心管连同试管套一起用电子秤称重配平,必须对称放入转子正确选项解析:A:离心机操作过程中,转子停稳后方可打开门盖取出离心管,这是为了避免离心机突然启动造成危险或者损坏离心机。B:运行过程中严禁移动离心机,这可能会对离心机造成损害,甚至引发安全事故。C:离心机的转子号必须与所用转子的配置规格相符,否则会影响离心效果。D:装有溶液的离心管连同试管套一起用电子秤称重配平,这是为了保证离心管和溶液的重量与转子配置规格相符,确保离心效果。必须对称放入转子,这是为了避免离心管和溶液重量分布不均,影响离心效果。'
  45. 样品的总糖提取时,加NaOH的作用是( )

  46. A:中和HCl B:反应需要在中性条件下进行 C:反应需要在酸性条件下进行 D:反应需要在碱性条件下进行

  47. DNS试剂中为什么含有NaOH?( )

  48. A:使样品溶液保持与标准溶液的酸碱度一致。 B:还原糖在碱性条件下,可变成非常活泼的烯二醇,具有较强还原能力。 C:能与3,5-二硝基水杨酸更好的反应。 D:将多糖水解成单糖。

  49. 下列操作错误的是( )


  50. A:量出酶浸出液体积,称取(NH4)2SO4粉末达到70%,将酶液倒入(NH4)2SO4中 B:凝胶处理时倒入不锈钢锅内,煮沸1小时 C:准确记录无盐酶液,用1mol/L盐酸调pH至4 D:装柱时向柱内加入少量水,将凝胶悬液连续注入层析柱内

  51. Km是酶的特征常数,只与酶的性质有关,与酶浓度无关。( )

  52. A:错 B:对

  53. 电极缓冲液可反复使用,每次使用之后需要换电极。

  54. A:对 B:错
    AI参考:正确答案是B:错。电极缓冲液在使用过程中会被逐渐消耗,不能反复使用,每次使用后都需要更换新的电极缓冲液。'
  55. 脂肪酸的β-氧化是软脂酸从头合成的逆反应。( )

  56. A:对 B:错
    AI参考:B错。脂肪酸的β-氧化不是软脂酸从头合成的逆反应,而是脂肪酸分解代谢的重要过程。这个过程是在线粒体中进行的,需要一系列酶的催化作用。而软脂酸从头合成是在细胞质中进行的,与脂肪酸的β-氧化过程是两个不同的过程。因此,脂肪酸的β-氧化不是软脂酸从头合成的逆反应。'
  57. 酶的最适温度不是一个特征物理常数,它与作用时间长短有关。

  58. A:错 B:对

  59. 样品在上样前,需预先煮沸3分钟。

  60. A:对 B:错

  61. a-淀粉酶的灭活温度是100

  62. A:对 B:错
    AI参考:答案:B:错。淀粉酶的灭活温度通常在60-80℃之间,而不是100℃。因此,这个选项是错误的。'
  63. 酶的Km值是酶的特征常数,它不随测定的pH和温度的改变而改变。( )

  64. A:对 B:错

  65. 比色杯内溶液体积2/3-3/4,毛面在光路上。

  66. A:对 B:错
    AI参考:判断题比色杯内溶液体积2/3-3/4,毛面在光路上。答案:B: 错。解释:比色杯内溶液体积应该是在1/2到3/4之间,而不是2/3-3/4。毛面应该在光路外,而不是光路上。因此,这个描述是错误的。'
  67. 用移液器移取黏稠溶液时,可采用反向移液法,即吸液时将移液器控制按钮按到第二档吸取溶液,打出液体时按到第一档,部分液体残留在吸头内。此说法是否正确?( )

  68. A:对 B:错
    AI参考:答案是B:错。移液器在使用时应该尽量减少液体残留,以避免浪费和污染。因此,正确的操作应该是尽量在吸头内吸取足够的液体,然后迅速将控制按钮从第二档切换到第一档,将液体全部打出,避免液体残留。反向移液法可能会导致液体残留,因此这个说法是不正确的。'
  69. 转氨酶在氨基酸合成和分解,以及糖、蛋白质、脂肪三类物质代谢的相互联系中都起重要作用。 ( )

  70. A:错 B:对
    AI参考:正确答案是B:对。转氨酶是催化氨基酸与α-酮酸之间的氨基转移反应的酶,参与氨基酸的分解与合成,以及糖、蛋白质、脂肪三类物质代谢的相互联系。'
  71. 移液管管尖的液体可以用洗耳球吹出。

  72. A:对 B:错
    AI参考:判断题移液管管尖的液体可以用洗耳球吹出。 B:错。移液管管尖的液体应该用滤纸擦拭吸液管内壁,以去除残留的液体,避免对下一次测量产生影响。使用洗耳球吹出移液管管尖的液体可能会导致残留物污染下一次测量,从而影响准确度。因此,这个做法是不正确的。'
  73. 生物体有各种转氨酶,其中谷丙转氨酶和谷草转氨酶活力最强。( )

  74. A:错 B:对
    AI参考:答案是B:对。生物体中存在各种转氨酶,其中谷丙转氨酶和谷草转氨酶是两种重要的转氨酶,它们在生物体内的分布和活性有所不同,但都是生物体内重要的催化酶,在生物体的代谢过程中发挥着重要的作用。因此,谷丙转氨酶和谷草转氨酶活力都很强,不是只有其中之一。所以这个判断题的答案是B,即“对”。'
  75. 凝胶过滤是利用蛋白质和无机盐相对分子质量差异进行分离纯化。

  76. A:对 B:错
    AI参考:答案:B:错。凝胶过滤法是利用凝胶的分子筛作用和形状选择性对蛋白质进行分离纯化。蛋白质和无机盐的相对分子质量差异不是凝胶过滤法分离纯化的主要依据。'
  77. 测定未知蛋白质的分子量,应该根据蛋白分子量的范围选择合适浓度的分离胶。( )

  78. A:对 B:错
    AI参考:答案:B:错。蛋白质分子量在几千到几十万道尔顿范围内的蛋白质更适合使用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)测定分子量。而凝胶过滤法通常用于测定分子量大于几万道尔顿的蛋白质。因此,选择分离胶的浓度时,应根据蛋白质的性质和分离需求来确定,而不是蛋白质分子量的范围。因此,这个判断题是错误的。'
  79. 硫酸肼作为稳定剂,用来保护3-磷酸甘油醛,使不生成磷酸二羟丙酮。

  80. A:错 B:对
    AI参考:B. 对。硫酸肼作为稳定剂可以保护磷酸甘油醛,使其不生成磷酸二羟丙酮。磷酸甘油醛是糖酵解过程中的一种中间产物,它可以转化为磷酸二羟丙酮和丙酮酸,这是糖酵解过程中的一个重要步骤。而硫酸肼可以稳定磷酸甘油醛的结构,使其不发生反应,从而保护了糖酵解过程中的正常进行。'
  81. 在测定酶活力的实验中底物是过量的。( )

  82. A:对 B:错

  83. 检测移液枪是否漏液:吸取液体后悬空垂直放置几秒中,看看液面是否下降。

  84. A:对 B:错
    AI参考:正确答案是B:错。检测移液枪是否漏液的方法应该是使用后立即将枪尖朝上放置,并确保移液枪完全密封后再进行下一次操作。吸取液体后悬空垂直放置几秒中,液面下降不一定是漏液,也可能是液体表面张力作用的结果。因此,这种方法不能准确判断移液枪是否漏液。'
  85. 人血清蛋白在pH8.6的巴比妥-巴比妥钠缓冲液中带负电。( )

  86. A:对 B:错
    AI参考:答案:B:错。人血清白蛋白在pH8.6的巴比妥-巴比妥钠缓冲液中不显负电,而呈中性。这是因为人血清白蛋白的等电点是4.9,在pH8.6的缓冲溶液中,蛋白质分子的净电荷为零,即蛋白质整体上不带电。因此,这个说法是错误的。'
  87. 样品在上样前,需预先煮沸3-5分钟。( )

  88. A:错 B:对
    AI参考:答案是B:对。样品在上样前,需预先煮沸3-5分钟,这样可以保证样品的准确性和稳定性。因此,这个说法是正确的。'
  89. 滴定终点是溶液显淡红色,且15秒内不褪色。( )

  90. A:错 B:对
    AI参考:正确答案是B:对。滴定终点是指溶液的颜色发生变化,通常是指由浅红色变成无色或由无色变成其他颜色。在滴定过程中,当溶液显淡红色时,说明已经达到滴定终点,此时溶液中的物质已经达到一定的浓度,且在15秒内不褪色,说明此时滴定已经完成。因此,滴定终点是溶液显淡红色,且15秒内不褪色是正确的。'

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