第一章 基因工程:1972年,Berg研究小组将λ噬菌体基因和大肠埃希菌(E.coli)乳糖操纵子基因插入猴病毒SV40 DNA中,首次构建出DNA重组体。由于SV40 能使哺乳动物致癌,出于安全角度考虑,他们放弃了这项工作。次年,Cohen和Boyer(1973)成功将细菌质粒通过体外重组后导入E.coli 细胞内,得到了基因的分子克隆,由此产生了基因工程。基因工程可用来表示一个特定的基因施工项目,也可泛指它所涉及的技术体系,其核心是构建重组体DNA技术。基因工程突出的优点之一就是打破了常规育种中难以突破的物种间的界限,使原核生物与真核生物、动物与动物、动物与植物,甚至人与其他生物之间的遗传信息可以相互重组和转移。如人的基因可以转移到E.coli 或酵母菌中表达,也可以转移到其他动物或植物中表达;细菌的基因同样可以转移到动物或植物中表达。1.1基因工程1:基因工程并不只是指一种技术,它涉及到一整套的技术体系,也可以用来表示一个特定的基因施工项目。 其定义是按照人们的愿望对携带遗传信息的分子(DNA)进行设计和改造,通过体外基因重组、克隆、表达和转基因等技术,创造出更符合人类需要的新生物类型的分子工程。又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞,以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。
1.2基因工程2:纯的无性繁殖也称为克隆,所以DNA重组技术也称为DNA克隆、分子克隆以及基因克隆,也就是将DNA限制性酶切片段插入克隆载体,导入宿主细胞,经过无性繁殖,获得相同的DNA扩增分子。 它包括以下几个步骤: 1)提取目的基因。 2)构建表达载体,即将目的基因与运载体结合。 3)将目的基因导入受体细胞。 4)目的基因的检测与鉴定。 其中构建表达载体是基因工程的核心,而要构建表达载体,目的基因和克隆载体都需要先经过切割变成连续、可再生的片段,然后再次拼接起来。这就需要用到一系列的工具酶了。
[单选题]PCR反应中常用的聚合酶为( )选项:[大肠杆菌DNA聚合酶
, T7 DNA 聚合酶, T4 DNA 聚合酶, Taq DNA 聚合酶
]
[单选题]在基因工程中,DNA重组和转化所用的“剪刀”、“针线”和“载体”分别是指( )选项:[DNA限制酶、RNA连接酶、质粒, 噬菌体、质粒、DNA连接酶
, DNA限制酶、DNA连接酶、质粒
, 大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶]
[单选题]在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指( )选项:[II类限制酶, I类限制酶, RNAase
, III类限制酶]
[单选题]现代对基因的定义是DNA分子中含有特定遗传信息的一段____序列总称,是遗传物质的最小功能单位。( )选项:[核糖核酸, 核酸, 脱氧核糖核酸, 核苷酸
]
[单选题]分子克隆主要是指( )选项:[DNA的大量复制
, RNA的大量反转录
, DNA的大量转录
, DNA的大量剪切
]
[单选题]在重组DNA技术中,不常用到的酶是( )选项:[DNA解链酶
, 限制性核酸内切酶
, DNA聚合酶
, DNA连接酶
]
[单选题]多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为( )选项:[3突出末端, 粘性末端
, 平头末端, 5突出末端]
[单选题]基因工程的基本程序一般不包括( )选项:[目的DNA与载体的连接, 工具酶的改造, 导入寄主细胞
, 制备目的DNA
]
[多选题]基因工程中常用的载体的种类有( )选项:[转基因载体
, 克隆载体, 质粒载体, 表达载体]
[多选题]基因工程有称为( )选项:[DNA体外重组技术, 细胞融合技术
, 微生物工程, 分子克隆]

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