第十五章 DNA重组与重组DNA技术：DNA重组是指不同DNA分子断裂和连接而产生DNA片段的交换并重新组合形成新DNA分子的过程。自然界的基因重组和基因转移方式有多种。在原核和真核细胞均可发生的有：发生在同源序列间的同源重组、在两个DNA特异位点间发生的位点特异性重组、基因从基因组一个位置移动到另一位置的转座重组。仅发生在原核细胞的还有接合、转化和转导等。转化作用是通过自动获取或人为地供给外源DNA，使细胞获得新的遗传表型。转导作用是指当病毒从被感染细胞释放、再次感染另一细胞时，发生在供体与受体细胞间的DNA转移及基因重组。重组DNA技术是指在体外将2个或2个以上DNA分子重新组合并在适当细胞中增殖形成新DNA分子的过程。其基本操作包括获取目的DNA（分）、选择与构建载体（择）、目的DNA与载体连接（接）、重组DNA转入受体细胞（转）和重组体的筛选与鉴定（筛）。依据载体的不同，重组的目的基因可在原核或真核细胞中表达。限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶等是重要的基因操作工具酶。拟克隆的基因称为目的基因。获取目的基因的途径包括人工合成、从基因组DNA文库和cDNA文库中筛选、PCR扩增等。载体本身也是DNA分子，可携带外源基因在受体细胞中无性繁殖或表达出有意义的蛋白质。将目的基因连接入载体的方式主要有黏端连接、平端连接和黏-平端连接。将重组DNA转入宿主细胞的方法主要有转化、转染和感染等。筛选和鉴定重组体的主要方法有遗传标志筛选法、序列特异性筛选法、亲和筛选法等。表达目的基因的体系包括原核和真核表达体系，二者各具优势和不足。常用的原核表达体系是大肠杆菌表达体系，常用的真核表达体系有酵母表达体系、昆虫表达体系和哺乳类细胞表达体系。目前，重组DNA技术已在生物制药、疾病动物模型的制备、疾病基因的发现和克隆、基因诊断与基因治疗等诸多方面得到了广泛应用。15.1DNA重组与基因转移:1、准确背诵基因重组、与同源重组的定义，能够理解Holliday模型的过程。 2、记忆接合、转化、转导的概念并能够区分。[单选题]
15.2重组DNA技术:1、背诵克隆，克隆载体、表达载体的定义，记住克隆载体的基本特点，表达载体的分类。 2、记忆DNA重组常用工具酶有哪些，Ⅱ类限制性核酸内切酶识别序列特点。 3、准确记忆获取目的基因的方法有哪些。 4、准确记忆基因克隆的目的，能够区分哪些DNA与载体连接的方式属于定向克隆。 5、准确记忆重组DNA导入受体细胞的方式及受体菌的条件，能够描述重组体的筛选与鉴定的方法。 6、准确记忆原核表达载体与真核表达载体的优缺点。 7、能够描述DNA克隆的主要步骤。
15.1DNA重组与基因转移:1、准确背诵基因重组、与同源重组的定义，能够理解Holliday模型的过程。 2、记忆接合、转化、转导的概念并能够区分。
15.2重组DNA技术:1、背诵克隆，克隆载体、表达载体的定义，记住克隆载体的基本特点，表达载体的分类。 2、记忆DNA重组常用工具酶有哪些，Ⅱ类限制性核酸内切酶识别序列特点。 3、准确记忆获取目的基因的方法有哪些。 4、准确记忆基因克隆的目的，能够区分哪些DNA与载体连接的方式属于定向克隆。 5、准确记忆重组DNA导入受体细胞的方式及受体菌的条件，能够描述重组体的筛选与鉴定的方法。 6、准确记忆原核表达载体与真核表达载体的优缺点。 7、能够描述DNA克隆的主要步骤。
在重组DNA技术中，不常用到的酶是
选项:[DNA解链酶, DNA聚合酶, 反转录酶, DNA连接酶, 限制性核酸内切酶]
[单选题]
多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为
选项:[缺口末端, 5'突出末端, 平头末端, 粘性末端, 3'突出末端]
[单选题]
就分于结构而论，质粒是
选项:[环状单链RNA分子, 线状单链DNA分子, 环状单链DNA分于, 环状双链DNA分子, 线状双链DNA分子]
[单选题]
发生在同源序列间的重组称为
选项:[非位点特异的重组, 基本重组（同源重组）, 人工重组, 位点特异的重组]
[单选题]限制性核酸内切酶切割DNA后产生
选项:[5'磷酸基和3'羟基基团的未端, 5'羟基和3'羟基基团的末端, 3'磷酸基和5'羟基基团的末端, 5'磷酸基和3'磷酸基团的末端]
[单选题]
在重组DNA技术领域所说的分子克隆是指
选项:[建立单克隆抗体, 无性繁殖DNA, 建立多克隆抗体, 构建重组DNA分子]
[单选题]
无性繁殖依赖DNA载体的最基本性质是
选项:[自我转录能力, 青霉素抗性, 自我复制能力, 自我表达能力]
[单选题]
在已知序列的情况下获得目的DNA最常用的是
选项:[聚合酶链式反应, 化学合成法, 筛选基因组文库, 筛选cDNA文库]
[单选题]
重组DNA技术领域常用的质粒DNA是
选项:[真核细胞染色体DNA的一部分, 细菌染色体DNA的一部分, 病毒基因组DNA的一部分, 细菌染色体外的独立遗传单位]
[判断题]分子克隆的基本过程可以概况为：分、切、接、转、筛和基因表达。选项:[错, 对]
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