第四章 核酸定量检测技术：1996年，美国Applied Biosystems公司首次推出实时荧光定量PCR技术，所谓实时荧光定量PCR技术。本章将介绍如下内容：实时荧光定量PCR技术的基本原理，引物、探针的设计基本原则，实时荧光定量PCR相关结果的分析方法，实时荧光定量PCR反应体系和条件的优化。4.1实时荧光定量PCR的基本原理:实时荧光定量PCR的原理及常用的概念--介绍实时荧光定量PCR中常用的概念；PCR扩增的理论模式。荧光染料技术和荧光探针技术--介绍实时荧光定量PCR中的荧光化学物质及两种实时荧光定量PCR技术荧光染料技术和荧光探针技术[单选题]关于TaqMan探针技术的描述，不正确的是（ ）选项:[操作亦比较简单, 易受到Taq DNA聚合酶5′-3′核酸外切酶活性的影响, 解决了荧光染料技术非特异的缺点, 无需进行寡核苷酸熔解曲线分析，减少了实验时间, R基团与Q基团相距较远，淬灭不彻底，本底较高]
4.2实时荧光定量PCR引物和探针的设计原则:实时荧光定量PCR引物和探针的设计原则--介绍实时荧光定量PCR引物设计的基本原则和探针设计的基本原则。
4.3实时荧光定量PCR测定的数据分析:实时荧光定量PCR测定的数据分析--介绍实时荧光定量PCR测定的数据分析，两种方法相对定量和绝对定量。
4.4实时荧光定量PCR的实验操作:实时荧光定量PCR的实验操作--介绍实际的实时荧光定量PCR操作过程。
4.1实时荧光定量PCR的基本原理:实时荧光定量PCR的原理及常用的概念--介绍实时荧光定量PCR中常用的概念；PCR扩增的理论模式。荧光染料技术和荧光探针技术--介绍实时荧光定量PCR中的荧光化学物质及两种实时荧光定量PCR技术荧光染料技术和荧光探针技术
4.2实时荧光定量PCR引物和探针的设计原则:实时荧光定量PCR引物和探针的设计原则--介绍实时荧光定量PCR引物设计的基本原则和探针设计的基本原则。
4.3实时荧光定量PCR测定的数据分析:实时荧光定量PCR测定的数据分析--介绍实时荧光定量PCR测定的数据分析，两种方法相对定量和绝对定量。
4.4实时荧光定量PCR的实验操作:实时荧光定量PCR的实验操作--介绍实际的实时荧光定量PCR操作过程。
[单选题]以下为比较Ct法的相对定量的描述，不正确的是（ ）。选项:[使机体的不同组织，以及不同实验处理组之间的基因表达的变化具有可比性, 运用了数学公式来计算相对量, 没有考虑PCR扩增效率对定量结果的影响, 实验条件无需严格优化, 无需再对看家基因和目的基因做标准曲线]
[单选题]SYBR Green Ⅰ技术常要求扩增片段不大于（）。选项:[100bp , 50bp, 300bp, 400bp, 200bp]
[单选题]TaqMan探针技术要求扩增片段应在（） 选项:[250～300bp , 300～350bp, 50～150bp , 200～250bp , 150～200bp ]
[单选题]下列关于real-time PCR引物设计的原则中，不正确的是（ ）选项:[两条引物的Tm值相差尽量大, 尽量避免引物二聚体的出现, 引物过长可能提高退火温度, 反应体系中引物的浓度一般在0.1~0.2μmol/L之间, G+C的含量应在45%～55%之间]
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