第四章 土豆酪氨酸酶的提取、分离、纯化：本章对蛋白质的提取分离纯化的流程进行了讲解，重点介绍了本次实验涉及的有机溶剂沉淀法及凝胶排阻层析法的原理、应用与操作要点，同时通过操作示范对柱层析的操作过程及注意事项进行了教学。在数据处理部分，学生们将学习到洗脱曲线的绘制方法。4.1实验原理:土豆酪氨酸酶的提取、分离、纯化的实验原理[多选题]有机溶剂沉淀法中影响蛋白质沉淀效果的因素包括选项:[体系温度, 是否存在金属离子, 溶液pH值, 目的蛋白的浓度]
4.2操作示范:土豆酪氨酸酶的提取、分离、纯化的操作示范
4.3结果处理与注意事项:土豆酪氨酸酶的提取、分离、纯化的结果处理与注意事项
[多选题]如果目的蛋白质与杂质的分子量差异明显，那么可以采用哪些细分级分离方法？选项:[等电聚焦电泳, SDS-PAGE电泳, 超速离心, 分子筛层析]
[多选题]蛋白质分离纯化的前处理可以采用的方式包括选项:[研磨破碎, 超声破碎, 酶解, 沉淀]
[单选题]有机溶剂沉淀法比盐析法分辨率高，可以用于蛋白质的精度纯化。选项:[对, 错]
[单选题]当柱床体积相同时，细而长的凝胶柱往往比短而粗的凝胶柱对不同分子量大小的蛋白质的分离效果更高。选项:[对, 错]
[单选题]在利用凝胶层析色谱法纯化蛋白质时，分子量大的蛋白质比分子量小的蛋白质先从层析柱上洗脱下来。选项:[对, 错]
[单选题]由粗酶纯化获得精酶的过程中，酶的比活力随着酶的纯度提高而提高。选项:[对, 错]
[单选题]关于有机溶剂沉淀法分辨率的描述不准确的是哪个选项:[由粗酶获得精酶的纯化过程，土豆酪氨酸酶的比活力大幅度上升，但总活力下降, 精酶总活力与粗酶总活力的比值反应了由粗酶制备精酶的产率, 土豆酪氨酸酶精酶的质量是由Bradford法测量得到的精酶浓度和接收得到的洗脱液总体积相乘计算的, 离心得到的粗酶沉淀中含有大量水分可以粗略使用装有粗酶的离心管质量减去空离心管质量计算得到的粗酶质量]
[单选题]在绘制凝胶层析柱纯化土豆酪氨酸酶的洗脱曲线时，酶标仪在480 nm处光吸收测量的是选项:[产物多巴色素（多巴红）的生成, 蛋白质浓度, 底物左旋多巴的消耗, 质粒DNA的浓度与纯度]
[单选题]该实验在制备土豆匀浆时，需要加入抗坏血酸，这样做的主要目的是选项:[防止实验原料氧化, 提高有机溶剂沉淀效率, 使酪氨酸酶更易沉淀出来, 提高有机溶剂沉淀的分辨率]
[多选题]以下关于有机溶剂沉淀法分离土豆酪氨酸酶的实验描述不正确的是选项:[有机溶剂沉淀法相对于盐析，分辨率更高，蛋白质活性更易，使用得也更广泛, 亲水性有机溶剂抢夺了蛋白质表面的水化层，促进了蛋白质相互聚集沉淀, 实验中保持冰上操作的目的是为了避免蛋白酶对土豆酪氨酸酶的降解, 亲水性有机溶剂降低了体系的介电常数，蛋白质之间的电荷吸引力加大，相互聚集沉淀]
[单选题]凝胶层析法一种常用的蛋白质纯化技术。以下关于凝胶层析法的描述不准确的是选项:[葡聚糖凝胶交联度越高，凝胶颗粒内网孔结构越紧密，对蛋白质的纯化效果越好, 在装填凝胶层析柱时，同样体积的凝胶装成细而长的层析柱要比短而粗的层析柱对蛋白质的分离效果会更好, 也被称为分子筛层析法和排阻层析法, 不仅可以分离分子量大小不同的蛋白质，还可以分离蛋白质和缓冲液中的盐]
[单选题]粗分级分离最主要是利用了物质之间的什么性质差异进行的？选项:[亲和性, 溶解度, 分子大小, 所带电荷]
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