第九章 PCR及酶切鉴定转化产物：本章的实验内容是延续上一章的实验，即使用聚合酶链反应（PCR）和限制性内切酶酶切法对转化得到的质粒DNA进行鉴定。除这一实验过程中涉及到的相关技术原理、操作和注意事项外，作为拓展，还对PCR反应的主要类型及其应用、PCR反应的条件优化进行了教学。9.1实验原理:PCR及酶切鉴定转化产物的实验原理[单选题]PCR反应最主要是利用了DNA哪方面的性质？选项:[两性离子, 变性与复性, 可被酶或化学试剂水解, 紫外吸收性]
9.2操作示范:PCR及酶切鉴定转化产物的操作示范
9.3结果处理与注意事项:PCR及酶切鉴定转化产物的结果处理与注意事项
[单选题]以下哪一种试剂不属于PCR反应所需的原料？选项:[NTP, DNA聚合酶, 模板DNA, 引物]
[多选题]PCR反应没有出现预期的扩增产物，有可能的原因包括选项:[模板含量过低, 引物设计不合适, 缓冲体系不合适或体系中存在蛋白酶抑制剂, PCR循环设置条件未优化]
[多选题]以下关于本次实验的操作，正确的是选项:[可以根据实验所需的管数，现将基础的试剂配好混匀后分装至各试验管, 配制反应液时可在室温下操作, 无论是DNA聚合酶还是限制性内切酶，都应在所有试剂全部加完之后最后加入, 所使用的耗材应为无菌的一次性耗材]
[多选题]下列关于实时荧光PCR技术中探针的描述，正确的是选项:[Taqman探针利用的是荧光能量共振转移的原理, Taqman探针是需要根据具体扩增片段进行特定设计的, SYBR Green探针在与单链DNA结合时可以发出荧光, 由于加入探针的量是有限的，因此在PCR反应进行到后期时，检测到的荧光值会出现检测平台]
[单选题]以下关于琼脂糖凝胶电泳的叙述，不正确的是选项:[只要分子量大小一致，不同的DNA在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率是一样的, 琼脂糖属于高分子聚合物，根据其浓度可以形成不同大小的孔径, DNA分子在进行电泳时，是从负极向正极移动, 可以直接将荧光染料加入到琼脂糖凝胶中，这样就可以在电泳结束后直接在紫外灯下成像]
[单选题]逆转录PCR（RT-PCR）使用的起始原料（模板）是选项:[基因组DNA, mRNA, 质粒DNA, cDNA]
[单选题]如果需要进行多重定量PCR检测，也就是在同一个体系里同时检测多个目的基因片段，可以使用SYBR Green探针。选项:[错, 对]
[单选题]对新冠肺炎疑似患者进行的核酸检测的实质是进行实时定量的逆转录PCR实验。选项:[对, 错]
[单选题]限制性内切酶切割DNA链，产生的是具有粘性末端的产物。选项:[对, 错]
[单选题]限制性内切酶作用的实质是使DNA水解断裂，破坏磷酸二酯键。选项:[错, 对]
[单选题]所谓的“退火”，其实就是双链DNA变性解链后，发生复性的过程。选项:[对, 错]
[多选题]如何能够尽量避免在PCR反应出现非特异性扩增？选项:[调整缓冲体系中的溶液组成成分, 降低退火温度, 减小加入的模板DNA或聚合酶的量, 重新设计引物]
[单选题]进行PCR时，如果分别以基因组DNA和质粒DNA作为模板来说，在同样的体系中基因组DNA的需要量往往比质粒DNA的要少。选项:[错, 对]
[单选题]进行常规PCR时，定制的PCR引物使用脱盐纯化进行纯化就可以了。选项:[对, 错]
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