第七章 ELISE法测定血清中干扰素水平:本章详细介绍了ELISA法的原理、分类、过程及主要应用范围,在操作示范过程进一步加强了使用多道移液器和多孔板进行实验的单元操作教学,同时具体讲解了ELISA结果的处理、分析及常见错误。7.1实验原理:ELISE法测定血清中干扰素水平的实验原理
7.2操作示范:ELISE法测定血清中干扰素水平的操作示范
7.3结果处理与注意事项:ELISE法测定血清中干扰素水平的结果处理与注意事项
[多选题]关于多道移液器的使用注意事项,正确的选项包括

选项:[一旦吸头碰到孔内其他液体,立即更换新的洁净吸头, 慢吸慢放以确保吸液体积准确无误, 确保各个道次之间的吸液体积一致, 为避免吸头污染,应在放液时悬空放液]
[多选题]ELISA实验中,包括哪些单元操作?

选项:[使用酶标仪进行紫外检测, 电泳, 利用多道移液器加样与混匀, 洗板]
[单选题]ELISA实验的最后一步——发光底物的检测中,加入终止液后,什么时候进行检测都可以。

选项:[对, 错]
[单选题]在ELISA实验中,一抗包被完毕的酶标板可以直接进行下一步,即加入样品溶液孵育的步骤。

选项:[错, 对]
[单选题]在实验设计没有问题的情况下,洗板是否彻底成为了ELISA实验成败的关键。

选项:[错, 对]
[单选题]夹心法中,一抗和二抗识别的抗原表位应该是同一个。

选项:[错, 对]
[单选题]96孔板虽然可以吸附抗原或抗体,但是不能够参与免疫反应。

选项:[错, 对]
[多选题]以下关于ELISA实验设计与优化的叙述,正确的是

选项:[如果标准曲线线性较差,可以考虑重新溶解标准品,且在开盖前进行离心, 更换底物溶液或重新配制底物溶液有助于提高检测信号, 首先要确保所选择的一抗是适用于ELISA实验的, 降低缓冲液的盐浓度有利于减少实验中出现的非特异性结合]
[多选题]抗原或抗体可以通过哪些作用力吸附到固相载体上?

选项:[共价作用力, 静电力(离子键), 疏水力, 亲水键]
[单选题]以下关于ELISA实验中非特异性结合的描述,不正确的是

选项:[非特异性结合与目的蛋白和抗体之间的亲和结合相比,结合力微不足道,不会影响实验结果, 要减少非特异性结合,洗板这一个步骤是非常重要的, 加入封闭液也是为了最大限度地减少非特异性结合, 非特异性结合就是样品中非目的蛋白与抗体的结合]
[单选题]以下关于洗板这个步骤的描述,错误的是

选项:[所谓的洗板充分,是指洗板时加入的洗脱缓冲液充足,以及洗板时间和次数足够, 通过洗板,可以将酶标板上吸附的非特异性结合的抗体或抗原洗去, 如果没有洗板机,可以采用迅速甩出板内溶液后,倒扣在纸巾上吸干水分的方式进行洗板, 如果检测结果背景偏低,有可能是洗板不充分导致的]
[单选题]关于夹心法和竞争法异同点的描述,不正确的选项是

选项:[固定在微孔板上的都是一抗, 夹心法中,一抗和二抗都是结合抗原;而竞争法中结合抗原的只有二抗, 都需要先后加入一抗和二抗, 最终的检测,都是看检测信号的强弱,检测信号越强,代表待测蛋白质的含量越丰富]
[单选题]ELISA法最终检测的信号实际上是

选项:[二抗自身的光吸收, 一抗自身的光吸收, 标记在二抗上的酶将底物转化为有色产物的光吸收, 抗原自身的光吸收]

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