山东理工大学
- 对于水的纯度，下列说法不正确的是
- 提取质粒时，溶液III的主要成分是
- 含pBV-dps-6his质粒的工程菌42℃诱导表达蛋白时
- 琼脂糖凝胶电泳时电压越大越好
- 提质粒时，溶液I中含EDTA的作用是
- 反应体系在配置体系的最后加入酶
- 反转录时，42 ℃水浴中保温30 min的作用是？
- 关于聚丙烯酰胺不连续凝胶，下列说法错误的是
- Western blot实验时，封闭的作用是封闭NC膜或PVDF膜上剩余的疏水结合位点，也就是没有结合蛋白的位点。
- 进行琼脂糖凝胶电泳时，下列电压正常的是
- PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，下列有关PCR过程的叙述，不正确的是（ ）
- 下列有关重组DNA技术的叙述，正确的是（）
- 进行SDS-PAGE时,没有有毒性的物质是
- 琼脂糖凝胶加入EB的温度是60℃
- Fenton反应的作用是产生羟基自由基
- 基因工程中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是：
- 提取质粒时，加入变性溶液后，下列哪些操作容易导致变性过度
- 关于EB的使用，下列说法不正确的是
- 促进丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺形成聚丙烯酰胺是
- 所获得的RNA其A260/A280的比值通常为?
- 反转录反应所需要的酶包括？
- PCR过程中的DNA变性是由于
- 实验中SDS-PAGE体系中使用到的缓冲体系的pH有
- pBV220表达载体是原核表达系统不能表达真核基因
- 对于本课程的特点，下列说法不正确的是
- 外源基因只能插到融合蛋白的羧基端进行融合表达
- 插入到pBV-dps-2x-6his融合表达的外源目的基因5’-端的内切酶应当是
- 下列关于平板的操作正确的是
- 为了保证菌液培养至对数期，我们一般使菌液的OD值处于（）之间。
- 下列对载体中MCS的说法不正确的是
- 常用的低分子量蛋白标准分子量中含有
- 常用的DL2000DNA标准分子量中含有
- 沉淀完成后，酶切产物应当加入（）来溶解保存
- 配制400ml LB培养基，为了使培养基中抗生素（Amp）浓度达到50ug/ml，下列说法正确的是
- 在本课程中下列实验内容属于拓展实验内容的是
- 琼脂糖凝胶带什么电荷
- 蛋白凝胶电泳系统中促进凝胶聚合的化学试剂是
- 湿法转膜仪黑色电极板一侧为正极。
- 下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是：
- 挑阳性克隆是指能在氨苄青霉素平板上生长的单一菌落细菌
- 为了方便后续酶切连接，引物要设计上酶切位点
- 新DNA合成的方向是5'到3'方向
- SDS-PAGE蛋白电泳上样缓冲液中应含有
- 从溶液中沉淀质粒DNA可使用的试剂是
- 采用何种方式进行基因工程蛋白诱导表达与表达的基因有关
- 外源基因只能插到融合蛋白的氨基端进行融合表达
- 加抗生素和2%琼脂的LB培养基不属于
- 诱导大肠杆菌感受态时，下列操作不正确的是
- 包涵体溶解一般要用至少含有（）mol/L的尿素缓冲液
- 在蓝白斑筛选实验中，转化了重组质粒的细菌长出的菌落为（）
A:去离子水>双蒸水 B:三蒸水>纯水（RO水） C: 双级反渗透水（双级RO水）> 超纯水 D:超纯水> 三蒸水
答案:C
A:葡萄糖和EDTA B:醋酸钾-醋酸 C:SDS D:NaOH
答案:醋酸钾-醋酸
A:PLPR活性被抑制 B:CIts857活性被抑制 C:Ori活性被抑制 D:Amp活性被抑制
答案:B: CIts857活性被抑制
A:错 B:对
答案:错
A:作为去污剂，使细胞碎片易沉淀 B:增加渗透压，使细胞易裂解 C:螯合金属离子，使DNA酶失活 D:调节pH，使细胞不易裂解
答案:螯合金属离子，使DNA酶失活
A:错 B:对
答案:对
A:使mRNA变性 B:使OligodT与模板结合 C:使cDNA链合成 D:使OligodT变性
答案:B: 使OligodT与模板结合
A:pH 不连续 B:点位梯度（或缓冲体系）不连续 C:胶浓度不连续 D:胶的成分不连续
答案:胶的成分不连续
A:对 B:错
答案:对
A:30 B:70 C:100 D:50
A:PCR反应过程中必须不断地加入模板和引物 B:PCR反应包括变性、复性和延伸三个循环过程 C:复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成 D:A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键
A:只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达 B:选细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快 C:重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 D:所有的限制酶都只能识别一种特定的核苷酸序列
A:TEMED、过硫酸铵 B:甘氨酸 C:丙烯酰胺、N ，N′‐亚甲基双丙烯酰胺 D:考马斯亮蓝、β‐巯基乙醇
A:对 B:错
A:对 B:错
A:RNA聚合酶 B:RNA连接酶 C:DNA聚合酶 D:DNA连接酶
A:置于冰上 B:旋涡振荡均匀 C:时间控制（一般不超过5分钟） D:轻柔翻转EP管
A:污染EB的物品或器皿立即丢掉 B:在棕色瓶中密封 C:使用时需戴手套 D:在通风橱中配置
A:TEMED B:AP C:SDS D:Tris
A:大于1.8 B:小于2.0 C:小于1.8 D:大于2.0
A:Taq B:MMLV C:RNase D:DNase
A:酶的作用 B:高温 C:机械力 D:低温
A:6.8 B:8.8 C:8.3 D:5.4
A:对 B:错
A:各个小实验项目互不关联 B:具有基础性和开放性 C:实验课题来自科研成果转化 D:适合集中时间开展实验
A:对 B:错
A:EcoRI B:XbaI C:XhoI D:BanHI
A:灭菌结束立即在培养基中加抗生素 B:平板用封口膜封口可在4℃冰箱保存一段时间 C:培养基温度降到55 ℃左右时倒平板 D:接种后的平板在培养箱内倒置培养
A:0.1-0.2 B:0.2-0.4 C:0.6-0.8 D:0.4-0.6
A:是多克隆位点 B:插入外源基因时只能用一种酶切开 C:是外源基因插入的位点 D:有多种限制酶的单一切点
A:30kD B:66kD C:20kD D:97kD
A:300bp B:2000bp C:200bp D:500bp
A:无水乙醇 B:CaCl2溶液 C:双蒸水 D:KAc溶液
A:应在培养基灭菌后加入浓度为50mg/ml的 Amp储备液800ul B:应在培养基灭菌后加入浓度为50mg/ml的 Amp储备液400ul C:应在培养基灭菌前加入浓度为50mg/ml的Amp储备液 200ul D:应在培养基灭菌后加入浓度为50mg/ml的Amp储备液 200ul
A:PCR扩增dps基因 B:质粒的提取 C:融合蛋白表达载体的构建 D:dps基因和质粒的重组
A:负电荷 B:正电荷 C:不带电荷 D:正负电荷
A:TEMED B:AP C:SDS D:ACR
A:对 B:错
A:在细胞分裂时恒定地传给子代细胞 B:具有自我复制功能 C:小型环状双链DNA分子 D:携带有某些抗性基因
A:错 B:对
A:错 B:对
A:对 B:错
A:溴酚蓝 B:EB C:SDS D:巯基乙醇
A:酚-氯仿-异戊醇（25：24：1）） B:异戊醇 C:异丙醇 D:无水乙醇
A:错 B:对
A:对 B:错
A:选择培养基 B:合成培养基 C:加富培养基 D:固体培养基
A:所用的大肠杆菌含有质粒 B:需要进行无菌操作 C:用冷的CaCl2诱导过夜培养的大肠杆菌 D:需要用冷的CaCl2诱导
A:2 B:4 C:6 D:0
A:白色 B:红色 C:黑色 D:蓝色
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