第三章 核酸体外扩增及定性检测技术:自从1953年沃森和克里克发现了DNA 双螺旋结构以来,人们对核酸的研究逐步深入。1985年K.Mullis等建立了体外DNA扩增技术---聚合酶链反应(PCR)技术,该技术模拟体内核酸合成过程,能够快速方便地获得大量特异拷贝的核酸片段。本章节具体介绍了如下的内容包括了聚合酶链反应的基本原理和过程、反应体系组成和扩增参数,逆转录PCR、多重PCR、巢式PCR、转录依赖扩增、链置换扩增、bDNA扩增技术的原理及临床应用,靶序列扩增、探针序列扩增和信号扩增等。3.1PCR技术:PCR技术-讲述PCR扩增技术原理及基本过程;PCR反应体系及扩增参数。引物的设计原则-讲述PCR中引物的设计的原则及如果在实际过程中设计引物。
3.2其他PCR技术:其他PCR技术-介绍R-FRLP、PCR-ASO、PCR-SSCP等PCR产物分析原理及主要临床应用。
3.3PCR产物分析:PCR产物分析-PCR产物分析是为了判断PCR扩增的有效性和正确性、对产物进行定量分析以及对PCR产物进行序列分析。
3.4PCR实验操作:PCR实验操作-将理论联系实际,以实际的操作为例直观的为大家讲述如何进行PCR实验的操作。
3.1PCR技术:PCR技术-讲述PCR扩增技术原理及基本过程;PCR反应体系及扩增参数。引物的设计原则-讲述PCR中引物的设计的原则及如果在实际过程中设计引物。
3.2其他PCR技术:其他PCR技术-介绍R-FRLP、PCR-ASO、PCR-SSCP等PCR产物分析原理及主要临床应用。
3.3PCR产物分析:PCR产物分析-PCR产物分析是为了判断PCR扩增的有效性和正确性、对产物进行定量分析以及对PCR产物进行序列分析。
3.4PCR实验操作:PCR实验操作-将理论联系实际,以实际的操作为例直观的为大家讲述如何进行PCR实验的操作。
[单选题]以mRNA为模板合成cDNA的酶是( )

选项:[逆转录酶, TaqDNA聚合酶, DNA酶, RNA酶, 限制性内切酶]
[单选题]有关PCR的描述下列不正确的是( )

选项:[扩增的对象是DNA序列, 循环次数越多产物量就越大,可增加循环次数提高产物量, 由变性、退火、延伸组成一个循环, 是一种酶促反应, 引物决定了扩增的特异性]
[单选题]下列关于Taq DNA聚合酶的描述,错误的是( )

选项:[催化形成3´, 5´-磷酸二酯键, 以dNTPs为原料, 不具有3´    5´外切酶活性, 使DNA链沿5´→3´方向延伸, 扩增的DNA片段越长,碱基错配率越低]
[单选题]PCR反应过程中,退火温度通常比引物的Tm值( )

选项:[高5℃, 低5℃, 低15℃, 高15℃, 相等]
[单选题]PCR反应中延伸的时间取决于( )

选项:[模板的纯度, Taq DNA聚合酶的量, 待扩增片段的长度, 模板的含量, 引物长度]

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