第六章 生物分离工程:生物产品可以通过微生物发酵过程、酶促反应过程,或动植物细胞大量培养过程获得,包括传统的生物技术产品(氨基酸、有机酸、抗生素、维生素等)和现代生物技术产品(如DNA重组技术生产的医用多肽或蛋白、单克隆抗体)。 生物反应的产物通常由细胞、游离的细胞外代谢产物、细胞内代谢产物、残存的培养基成分和其他一些惰性成分组成的混合物。这些产物并不能直接应用,必须通过一系列提取、分离和纯化等后续加工才能得到可用的最终产品。生物分离工程是指从发酵液、酶反应液或动植物组织细胞培养液中将需要的目标产物经提取、浓缩、纯化及成品化的一门工程学科。6.1生物分离工程的基本路线及特点:生物产品的生产过程分为上游和下游。 上游指的是:基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程及组织工程。 通过这些上游工程可以生产出人类所需要的生物产品。 下游指的是:生物产品的回收——也就是生物分离与纯化技术,主要包括离心技术、细胞破碎技术、萃取技术、固相析出技术、色谱技术和膜分离技术等。 这些和我们前面所提到的发酵工程的下游工程是同一个意思,也即生物分离工程。
6.2蛋白质常用分离纯化手段 1:根据蛋白质不同的生理特性 有不同的方法分类,主要根据以下几个性质来设计纯化方法: 一、根据分子大小不同分离纯化: 蛋白质是一种大分子物质, 并且不同蛋白质的分子大小不同,因此可以利用一些较简单的方法使蛋白质和小分子物质分开,并使蛋白质混合物也得到分离。 根据蛋白质分子大小不同进行分离的方法主要有透析、超滤、离心和凝胶过滤等。 二、根据溶解度不同分离纯化 影响蛋白质溶解度的外部条件有很多,比如溶液的pH值、离子强度、介电常数和温度等。 常用的方法有等电点沉淀和pH值调节、蛋白质的盐溶和盐析、有机溶剂法、双水相萃取法、反胶团萃取法等。
6.3蛋白质常用分离纯化手段 2:三、根据电荷不同进行分离纯化 根据蛋白质的电荷即酸碱性质不同分离蛋白质的方法有电泳和离子交换层析两类。 四、利用对配体的特异亲和力进行分离纯化 亲和层析是利用蛋白质分子对其配体分子特有的识别能力 (即生物学亲和力) 建立起来的一种有效的纯化方法。 某些特定蛋白具有和某些相对应的专一分子可逆结合的特性,分子之间的这种结合能力称为亲和力。
[单选题]盐析法沉淀蛋白质的原理是( )

选项:[与蛋白质结合成不溶性蛋白
, 调节蛋白质溶液pH到等电点
, 中和电荷,破坏水膜
, 降低蛋白质溶液的介电常数
]
[单选题]蛋白质溶液的pH接近其等电点时,蛋白质的溶解度 ( ) 。

选项:[零
, 最小, 最大, 恒定]
[单选题]分离纯化早期,由于提取液中成分复杂,目的物浓度稀,因而易采用 ( )

选项:[分离量大分辨率低的方法, 分离量小分辨率低的方法
, 各种方法都试验一下,根据试验结果确定
, 分离量小分辨率高的方法]
[单选题]在超滤过程中,主要的推动力是:( )。

选项:[电势差
, 重力
, 压力, 浓度差]
[单选题]离子交换法是应用离子交换剂作为吸附剂,通过( )将溶液中带相反电荷的物质吸附在离子交换剂上。

选项:[静电作用
, 范德华力
, 氢键作用
, 疏水作用
]
[单选题]下列哪种方法不是根据分子大小和形状分离大分子物质的? ( )

选项:[离子交换层析, 离心分离, 凝胶过滤, 透析和超滤
]
[单选题]透析主要用于 ( ) 。

选项:[悬浮液的分离, 细胞分离, 蛋白质分离, 生物大分子溶液的脱盐
]
[单选题]阴离子交换剂( )。

选项:[可交换的为蛋白质
, 可交换的为阴、阳离子, 可交换的为阴离子, 可交换的为阳离子
]
[单选题]分子筛层析纯化酶是根据( )进行纯化。

选项:[根据酶分子电荷性质的纯化方法, 调节酶溶解度的方法
, 根据酶分子专一性结合的纯化方法
, 根据酶分子大小、形状不同的纯化方法]

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