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生物化学技术原理及应用
- 固定化酶（或微生物）的活性，一般用“相对活性”表示，即以游离酶（或微生物）的活性为100，与同量的酶（或微生物）偶联于载体后所显示的活性之比称做“相对活性”，常用百分数表示，该百分数是？
- 在进行某尿素酶盐析时（分级范围35%-55%饱和度硫酸铵，其pI为5.99）时，在一级沉淀（0-35%）时，硫酸铵溶液的pH应该是？
- 用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键?
- 可以用来测定蛋白质分子量的层析技术是
- 在进行蛋白质盐析时，选择抽提液的pH应在（ ）等电点的稳定范围内。
- 酶工程是（ ）的技术过程。
- 亲水性的蛋白质组分在疏水性层析柱上分离的次序是？
- 流化床反应器（ ）。
- 在凝胶层析的洗脱过程中，（ ）。
- 使用过的亲水性阳离子交换剂，可分别采用（ ）处理后再用蒸馏水漂洗、缓冲液平衡，令其恢复原来的性状（称再生），并且要求将其转成H型。
- 进行疏水层析时，以下哪种条件比较合适？
- 酶分子的物理修饰是通过物理方法改变酶分子的（ ）而改变酶的催化特性。
- 高效液相色谱需要在高压条件下进行操作，是因其固定相中基质颗粒直径（ ）所需的。
- 对生命大分子进行选择性沉淀（如离子强度）时，通常沉淀的物质是？
- 膜反应器是（ ）的酶反应器。
- 硫酸铵饱和度为25%的细胞色素c溶液150ml，问需加入多少饱和硫酸铵溶液才能使其饱和度达55%？
- 配体与待分离的物质有（ ）的亲和力，才能提高分离的效果。
- 关于蛋白质在等电点的特性描述，哪项是错误的？
- 对生命大分子进行选择性沉淀（如温度），通常沉淀的物质是？
- 利用荧光法测定谷草转氨酶的活力，其原理是
- 氨基酸和蛋白质共有的理化性质为（ ）。
- 在酶发酵过程中添加表面活性剂可以（ ）。
- 特异性不很强，但能和某一类蛋白质等生物大分子结合的配体，称通用性配体。例如，各种凝集素可以结合相应的糖蛋白；核酸可以结合RNA及其蛋白质等；又如肝素，可与各种（ ）物质具有一定的亲和力。
- 在疏水层析过程中，一般使用的固定相是由载体和（ ）两部分构成，载体有亲水性或疏水性两种。
- 胆碱酯酶可以用于检查有机磷农药污染，是由于（ ）。
- 根据有效成分和杂质理化性质的差异性，设计出的纯化大分子物质方案，欲评价其可行性的方法是？
- 对一个富含His残基的蛋白质，在使用离子交换层析时应优先考虑（ ）。
- 半抗原（ ）。
- 在进行某尿素酶盐析时（分级范围35%-55%饱和度硫酸铵，其pI为5.99）时，在二级沉淀（35%-55%）时，硫酸铵溶液（高盐溶液）的pH应该是？
- 在分离信使RNA（mRNA）时，常选用（ ）做固定相，装柱后可将mRNA与其他核酸分开。
- 将酶溶液进行干燥的目的有哪些？
- 在酶反应器的操作中，应该注意（）
- 高效液相色谱的分辨率比普通液相层析高的原因是？（从两个理论角度解释）
- 为什么微生物的发酵生产是工业生产酶制剂的主要来源？
- 在分子印迹酶的设计中，下列哪些物质适合作为印迹分子？
- 离子交换剂的选择，应该综合考虑下列哪些因素（）
- 离子交换层析的洗脱方式一般采用梯度洗脱，包括（）
- Kav表示某个组分在内水体积和外水体积中的比值，它是衡量（ ）的参数。
- 动物细胞在体外培养过程中（）
- 胰岛素含量的测定方法有？
- 蛋白质置于与其本身等电点相同的pH环境时，它将会发生沉淀。
- 离子交换剂中交联度越大，基质中筛孔直径越大，其膨胀度越大。
- 催化两个化合物缩合成一个化合物的酶称为合成酶。
- 重组质粒载体可以通过细胞转化方法将重组DNA转入受体细胞。
- 中空纤维生物反应器只能用于培养悬浮生长的细胞
- 蛋白质盐析时，一般可在室温下进行操作，使用有机溶剂（如乙醇、丙酮）也可在室温下进行。
- 葡聚糖凝胶Sephadex G-25、Sephadex G-50、Sephadex G-75、Sephadex G-100，G后面的阿拉伯数字代表凝胶吸水量（ml水/g干胶）乘以10；交联度大，孔径小，吸水量少，膨胀度也小，反之亦然。
- 如果pH低于待分离物质的PI，此时待分离物质带有正电荷，应该选择一种阳离子交换剂。
- 连续式培养方式在收获产物的同时，部分细胞也被取出。而灌流式培养在部分收获产物的时候，绝大部分细胞仍然保留在反应器内，因此灌流式培养是一种常用的培养方式。
- 在混合的蛋白质溶液中，不同分子间的相互作用会发生共沉淀现象。蛋白质浓度越高，这种现象越明显，盐析分析分离效果则越好。
- 离子交换剂的转型是指离子交换剂由一种平衡离子转为另一种平衡离子的过程。例如，对阳离子交换剂用HCl处理可将其转为Cl型，用NaOH处理为OH型。
- 阳离子交换剂在基质的表面键合有正电荷基团，可以用来结合带有负电荷的离子或离子化合物
- 亲和层析中配体的选择要注意两点，与待分离的生物大分子有很强的亲和力，还具有与基质共价结合的基因。
- 一般用于测定酶活力的常用方法是可见分光光度法，较灵敏的方法是同位素标记-分光光度法。
- 固定化细胞在一定的空间范围内生长繁殖，由于细胞密度增大，使生化反应加速，所以能够提高酶活力。
- 疏水层析是近年发展的新方法。它利用蛋白质表面有一部分疏水性，与带有疏水性的载体在低盐浓度时结合的特性。洗脱时将盐浓度逐渐增加，蛋白质因疏水性不同而逐个地先后被洗脱而纯化。
- 蛋白质盐析常用的中性盐是硫酸铵，其他中性盐，如氯化钠、硫酸铵、硝酸钾、硝酸铵等用得较少。
- 强碱型阴离子交换剂对OH-的结合力比Cl-小，而弱碱型阴离子交换剂对OH-的结合力比Cl-大
- 微载体培养系统是一种理想的动物细胞培养方法，具有单层培养和悬浮培养的优点。
- 只有以金属离子为激活剂的酶，才可以进行金属离子置换修饰。
A:<100% B:=100% C:>100%
AI参考:正确选项是B:=100%。固定化酶（或微生物）的活性一般用“相对活性”表示，即以游离酶（或微生物）的活性为100，与同量的酶（或微生物）偶联于载体后所显示的活性之比称做“相对活性”，因此相对活性是等于100%的。'
A:pH B:pH=5.99 C:pH>pI或pH D:pH>5.99
答案:pH>pI或pH
A:茚三酮 B:奈氏试剂 C:紫外吸收 D:凯氏定氮 E:双缩脲反应
答案:双缩脲反应
A:亲和层析 B:吸附柱层析 C:离子交换层析 D:凝胶过滤层析
答案:凝胶过滤层析
A:偏离 B:大于 C:小于
AI参考:在进行蛋白质盐析时，选择抽提液的pH应在小于等电点的稳定范围内，即选项C：小于。这是因为蛋白质在等电点时，其溶解度最低，如果选择在等电点以上的pH进行盐析，可能会使蛋白质析出而难以分离。而在小于等电点的盐析液中，蛋白质的溶解度较大，更容易被分离出来。因此，正确答案是C：小于。'
A:酶在工业上大规模应用 B:通过发酵生产和分离纯化获得所需酶 C:酶的生产与应用 D:利用酶的催化作用将底物转化为产物
答案:酶的生产与应用
A:疏水性强的先流出 B:亲水性弱的先流出 C:亲水性强与亲水性弱的分不开 D:亲水性强的先流出
AI参考:正确答案是D：亲水性强的先流出。蛋白质的亲水性越强，越容易进入水性介质中，因此亲水性强的蛋白质组分在疏水性层析柱上分离的次序是亲水性强的先流出。因此，答案为D。'
A:适用于游离酶进行间歇催化反应 B:适用于固定化酶进行连续催化反应 C:适用于游离酶进行连续催化反应 D:适用于固定化酶进行间歇催化反应
答案:内装催化剂;一种垂直圆筒形或圆锥形容器AI参考:正确答案是B:适用于固定化酶进行连续催化反应。流化床反应器适用于固定化酶进行连续催化反应。固定化酶可以在流化床反应器中进行高效的连续催化反应，这是因为固定化酶的稳定性高，易于操作和控制。游离酶在流化床反应器中进行间歇催化反应，效果可能不佳。因此，答案为B。'
A:盐分子最先流出 B:分子质量最大的分子最先流出 C:蛋白质分子最先流出 D:分子质量最小的分子最先流出
A:低浓度酸、碱溶液 B:高浓度酸、碱溶液 C:酸、碱溶液 D:低浓度碱、酸溶液
AI参考:使用过的亲水性阳离子交换剂，可分别采用低浓度酸、碱溶液处理后再用蒸馏水漂洗、缓冲液平衡，令其恢复原来的性状（称再生），并且要求将其转成H型。因此，选项A是正确答案。低浓度酸、碱溶液可以分解离子交换剂上的离子，使其恢复原来的性状。'
A:在有机溶剂存在时上柱，高盐溶液洗脱 B:在高盐条件下上柱，按低盐、水和有机溶剂顺序洗脱 C:低盐缓冲液上柱，低盐洗脱 D:在有机溶剂存在时上柱，低盐溶液洗脱 E:在低盐条件下上柱，高盐溶液洗脱
A:侧链基团 B:空间构象 C:空间构型 D:组成单位
A:无关 B:小 C:大
A:有效成分 B:杂质 C:部分杂质
A:利用半透膜进行底物与产物分离 B:将酶催化反应与膜分离组合在一起 C:利用酶膜进行反应 D:利用半透膜进行酶与产物分离
A:100ml B:75ml C:150ml D:50ml
A:较小 B:较强 C:非常大 D:弱
AI参考:正确答案是B：较强。配体与待分离的物质有较强亲和力才能提高分离的效果。配体是结合在离子或分子上的原子或原子团，是使离子或分子获得配位数后形成化合物而能互相配合传递电子对的离子或分子，能够增强或者增强粒子之间电子对的流动性，有利于物质分离。因此选择B，较强。'
A:溶解度最小 B:电泳迁移率最小 C:黏度减小 D:导电性最大
AI参考:错误描述：蛋白质在等电点时导电性最大。正确描述：蛋白质在等电点时，其溶解度最小，电泳迁移率最小，黏度减小，导电性减弱。因此，选项中导电性最大的描述是不正确的。'
A:有效成分或杂质 B:有效成分 C:大部分杂质
A:测定底物天冬氨酸含量降低的速度 B:测定苹果酸脱氢酶的活力 C:测定NADH荧光强度下降的速度 D:测定产物草酰乙酸浓度增加的速度
A:变性性质 B:双缩脲性质 C:沉淀性质 D:两性性质 E:胶体性质
A:阻遏酶的生物合成 B:提高酶活力 C:诱导酶的生物合成 D:提高细胞透过性
A:带负电荷 B:疏水性 C:带正电荷 D:亲水性
AI参考:答案：C。通用性配体指的是特异性不很强，但能和某一类蛋白质等生物大分子结合的配体。题干中的例子“肝素，可与各种带正电荷的物质具有一定的亲和力”正好符合这个概念。解释：肝素是一种常用的抗凝剂，具有强大的抗凝血作用。由于肝素带负电荷，因此可以和各种带正电荷的物质（如凝血因子、激肽原等）具有一定的亲和力，从而起到抗凝作用。其他选项中，带负电荷和疏水性属于生物大分子的常见性质，而亲水性和亲水性在描述上存在一定的模糊性，因此不太符合题意。因此，正确答案是C带正电荷。'
A:配体（亲水性基团） B:配体（疏水性基团） C:配体（极性基团）
AI参考:在疏水层析过程中，一般使用的固定相是由载体和配体（极性基团）两部分构成，载体有亲水性或疏水性两种。因此，正确答案是C：配体（极性基团）。'
A:有机磷农药是胆碱酯酶的一种激活剂 B:有机磷农药是胆碱酯酶的一种抑制剂 C:胆碱酯酶可以催化有机磷分解 D:胆碱酯酶可以催化胆碱酯水解
A:回收率 B:纯化倍数和回收率 C:纯度 D:有效成分的结构 E:纯化倍数
A:严格控制NaCl的浓度 B:严格控制洗脱液的体积 C:严格控制盐浓度 D:严格控制蛋白质上样液的浓度 E:严格控制洗脱液的pH值
A:可以与抗体特异结合，但不能诱导抗体生成 B:不能与抗体特异结合，也不能诱导抗体产生 C:可以诱导抗体生成，但不能与抗体特异结合 D:可以诱导抗体产生，也可以与抗原特异结合
AI参考:正确答案是D：可以诱导抗体产生，也可以与抗原特异结合。半抗原能与抗体结合，但不能诱导抗体的产生，只能与蛋白质载体结合，形成复合物后才能被免疫系统识别。因此，选项A、B、C都是错误的，只有选项D是正确的。'
A:pH=5.99 B:pH>pI或pH C:pH D:pH>5.99
A:寡聚胸腺嘧啶核苷酸（oligodT）-C B:胸腺嘧啶核苷酸-C C:寡聚尿嘧啶核苷酸（oligodU）-C D:核酸-C
AI参考:正确答案是A：寡聚胸腺嘧啶核苷酸（oligodT）-C。在分离信使RNA（mRNA）时，常选用寡聚胸腺嘧啶核苷酸（oligodT）做固定相，装柱后可将mRNA与其他核酸分开。这是因为寡聚胸腺嘧啶核苷酸上含有大量胸腺嘧啶核苷酸，而mRNA中也主要含有胸腺嘧啶核苷酸，二者具有较好的亲和力，所以能吸附在固定相上。因此寡聚胸腺嘧啶核苷酸可以作为mRNA和其他核酸的分界线，故选择A。其他选项中，胸腺嘧啶核苷酸、寡聚尿嘧啶核苷酸和核酸都不能作为固定相，不能将mRNA与其他核酸分开。'
A:液体酶制剂不便于运输 B:固体酶制剂保存期更长 C:液体酶制剂不容易保存 D:固体酶制剂更加稳定
AI参考:正确选项是【ABD】。将酶溶液进行干燥的主要目的是为了将酶制剂转化为固体或液体干燥形式，这样可以更便于储存、运输和使用。具体来说，液体酶制剂不易保存、容易变质，也不便于运输；而固体酶制剂可以长时间保存，稳定性更高，更便于储存和运输。因此，选项A、B、D都是正确的。选项C是错误的，因为液体酶制剂相对来说更容易保存。'
A:防止微生物的污染 B:保持反应器中流体的流动方式和状态不变 C:防止酶的变性和失活 D:保持反应温度、反应液pH，搅拌速度等反应条件的恒定
AI参考:在酶反应器的操作中，应该注意的问题包括：A. 防止微生物的污染：酶反应器中可能存在微生物污染的风险，因此需要采取适当的措施来防止微生物的污染，如使用适当的消毒剂、过滤器等。B. 保持反应器中流体的流动方式和状态不变：酶反应器中的流体流动方式和状态可能会影响酶的反应速度和产物生成，因此需要保持反应器中流体的流动方式和状态不变，以确保酶反应的稳定进行。C. 防止酶的变性和失活：酶是一种蛋白质，容易受到温度、pH、离子强度等因素的影响而变性或失活。因此，在酶反应器的操作中需要保持反应温度、反应液pH等条件恒定，以防止酶的变性和失活。D. 正确选项包括了上述所有要点。因此，正确选项为D:保持反应温度、反应液pH，搅拌速度等反应条件的恒定。'
A:柱体积大 B:基质颗粒细 C:操作规范 D:塔板理论数高 E:柱压高 F:加样量大
AI参考:正确答案是：B、基质颗粒细；D、塔板理论数高。高效液相色谱的分辨率比普通液相层析高的原因是柱体积大（A错）可以减小物质的分配系数差值，从而使物质分得更加均匀；但更重要的是基质颗粒细（B对），减小了色谱柱的阻力，有利于提高柱效和分辨率；塔板理论数高（D对）是高效液相色谱柱效高的重要原因之一；加样量大（F错）虽然可以增加进样量，但并不能提高分辨率；操作规范（C错）与分辨率关系不大；柱压高（E错）会影响分析速度和分辨率，不是主要原因。'
A:微生物适合采用大规模发酵培养，生长周期短 B:微生物种类繁多，基本含有所有酶的种类 C:微生物可以采用基因工程技术，构建基因工程菌 D:动植物组织生长周期长，来源有限
AI参考:正确选项为A:微生物适合采用大规模发酵培养，生长周期短。原因如下：1. 微生物适合采用大规模发酵培养，可以满足工业生产对酶制剂的大量需求。2. 微生物生长周期短，这使得利用微生物生产酶制剂的效率高，可以在较短的时间内实现大量生产。其他选项虽然有一定的相关性，但不是主要原因。B选项提到微生物种类繁多，基本含有所有酶的种类，但这并不是说它们是酶制剂的主要来源的原因。C选项虽然提到了基因工程技术的应用，但这并不适用于所有微生物，也不是主要原因。D选项虽然提到了动植物组织生长周期长和来源有限，但这与微生物发酵生产酶制剂没有直接关系。'
A:抑制剂 B:底物 C:过渡态类似物 D:底物类似物 E:产物
AI参考:正确选项是：B,C分子印迹技术主要是利用目标分子与特定印迹剂模板分子的相互作用力（如色谱吸附）进行选择性地富集或排斥目标分子。根据选项来看，底物（B）、过渡态类似物（C）都符合分子印迹技术所需的印迹分子要求。而抑制剂（A）、底物类似物（D）、产物（E）等并非最佳选择，它们在印迹过程中可能干扰印迹分子的吸附作用。因此，B和C是正确的选择。'
A:强弱离子交换剂的选择 B:离子交换剂所有的反离子的类型 C:阴阳离子交换剂的选择 D:基质的类型
A:密度梯度 B:离子强度梯度 C:pH梯度 D:极性梯度
A:蛋白质分子质量 B:分离物质 C:分离效果 D:核酸碱基对多少
A:对生长环境的变化非常敏感 B:大多数需要贴壁生长 C:生长非常缓慢 D:对培养基的营养要求相当苛刻
A:电化学法 B:光谱法（紫外分光光度法） C:免疫分析法 D:生物活性法
A:错 B:对
A:对 B:错
A:对 B:错
A:对 B:错
A:对 B:错
A:对 B:错
AI参考:答案是B：错。蛋白质盐析需要在低温下进行操作，以避免蛋白质变性。有机溶剂通常在较低温度下使用，以避免它们对蛋白质的破坏。因此，这个说法是错误的。'
A:对 B:错
A:错 B:对
A:错 B:对
AI参考:这个问题的答案为B：“对”。连续式培养方式在收获产物的同时，部分细胞也被取出，虽然灌流式培养在部分收获产物的时候，绝大部分细胞仍然保留在反应器内，但其并不能被称为一种常用的培养方式。所以这个说法是错误的。答案为“对”。'
A:错 B:对
AI参考:答案是B：对。在混合的蛋白质溶液中，不同分子间的相互作用会发生共沉淀现象，这种现象称为蛋白质的凝聚和聚集。当蛋白质浓度越高时，共沉淀现象越明显，这会影响蛋白质的分离效果。为了解决这个问题，可以通过加入适量的盐离子，使蛋白质分子之间的相互作用减弱，促进蛋白质分子的聚集和沉淀，从而实现蛋白质的分离。因此，蛋白质浓度越高，盐析分析分离效果则越差。所以本题答案为B。'
A:错 B:对
A:对 B:错
A:错 B:对
AI参考:B. 对。亲和层析中配体的选择确实要注意两点，除了与待分离的生物大分子有很强的亲和力外，还需要具有与基质共价结合的基因。这样才能确保配体能够有效地与基质结合，并且可以通过洗脱等方式进行分离和纯化。因此，这个判断题的答案是B，即“对”。'
A:错 B:对
A:错 B:对
A:对 B:错
A:对 B:错
A:错 B:对
AI参考:答案是B：对。根据题目描述，强碱型阴离子交换剂对OH-的结合力比Cl-小，而弱碱型阴离子交换剂对OH-的结合力比Cl-大。因此，该判断题描述是正确的，答案为B。'
A:错 B:对
AI参考:正确答案是B：对。微载体培养系统是一种理想的动物细胞培养方法，具有单层培养和悬浮培养的优点，因此选项B是正确的。微载体培养系统是将细胞接种在微载体上，微载体悬浮在培养液中，细胞可以在微载体上生长形成单层，同时微载体也可以作为支架支撑细胞生长，使细胞生长更加稳定。因此，微载体培养系统既可以用于单层培养，也可以用于悬浮培养。'
A:错 B:对
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